স্ট্যান্ডার্ড প্রস্তুতি:
প্রতিটি কাভালাকটোন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের প্রায় 10 মিলিগ্রাম 10 মিলিটার ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে নির্ভুলভাবে ওজন (± 0.01 মিলিগ্রাম) করে একটি মিশ্র স্টক স্ট্যান্ডার্ড প্রস্তুত করুন। দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত 7.0 এমএল মিথেনল এবং সোনিকেট যুক্ত করুন। মিথেনল এবং মিশ্রণের সাথে ভলিউমে হ্রাস করুন।
বিজ্ঞপ্তি: বিকল্পভাবে, কাভাইন স্টক স্ট্যান্ডার্ডটি অনুরূপভাবে প্রস্তুত করুন এবং কাভাল্যাকটোন প্রতিক্রিয়া ফ্যাক্টরগুলি এর বিপরীতে মাপতে ব্যবহার করুন।
সর্বনিম্ন চার-পয়েন্টের স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার জন্য স্টক স্ট্যান্ডার্ডটি সরু করুন। স্ট্যান্ডের প্রস্তাবিত স্ট্যান্ডার্ড ডিলিউশনগুলি হ'ল মিথেনল ব্যবহার করে 1:10, 1:25 এবং 1: 100।
বিজ্ঞপ্তি: রেফ্রিজারেটেড তাপমাত্রায় স্ট্যান্ডার্ড স্ট্যান্ডার্ড (0 - 5 ° C) কাভালাক্টোনগুলি 48 ঘন্টা পরে দ্রুত অবনমিত হয়। প্রতিটি বিশ্লেষণের আগে নতুন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড প্রস্তুত করার পরামর্শ দেওয়া হয়।
যন্ত্রপাতি
Analy বিশ্লেষণাত্মক ব্যালেন্স সঠিক। 0.01 মিলিগ্রাম
· ফ্লাস্ক, ভলিউম্যাট্রিক, ক্লাস এ, বিভিন্ন আকারের
Ials ক্যাপ, ক্যাপ সহ ক্রোম্যাটোগ্রাফি
US ইউএসপি অধ্যায়ে বর্ণিত উচ্চ পারফরম্যান্স তরল ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম। ইনস্টলেশন যোগ্যতা / অপারেশন যোগ্যতা (আইকিউ / ওকিউ) এর জন্য যন্ত্রপাতি, সফ্টওয়্যার এবং সাবসিস্টেমগুলি পারফরম্যান্সের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে যা যাচাই করুন এবং নথি করুন।
Ter ফিল্টার, 0.45 মিমি, গেলম্যান অ্যাক্রডিস্ক নাইলন (পি / এন 4426), হোয়াটম্যান পুরাদিস্ক ™ পলিপ্রোপিলিন (বিড়াল নং 6788-2504), হোয়াটম্যান জিডি / এক্স গ্লাস (বিড়াল নং 6894-2504) বা সমতুল্য সোনিকেটর
Umn কলাম, YMCbasic, 5 µm, 4.6 x 250 মিমি (ক্যাট। নং BA99S05-2546WT)। সমান কলাম, ওয়াইএমসি জেস্পিয়ার এইচ 80, 4µ, 4.6 এক্স 250 (ক্যাট। নং জেএইচ 08800-2546 ডাব্লুটি) T
বিকারকের
· জল, এইচপিএলসি গ্রেড বা ন্যানোপুর
· মিথেনল, এইচপিএলসি গ্রেড
· এসিটোনাইট্রাইল, এইচপিএলসি গ্রেড
· ফসফরিক এসিড, এসি রিজেন্ট গ্রেড
নমুনা প্রস্তুতি:
উদ্ভিদ উপাদান
সূক্ষ্মভাবে ওজন (± 0.1mg) প্রায় 750 মিলিগ্রাম সূক্ষ্ম স্থল স্টেম, ছুলা বা মূল উপাদান।
40 মিলি মিথেনল / জল (70/30) এর সাথে 50 মিলি এমএল ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে উপাদানটি রাখুন। ঘরের তাপমাত্রায় 60 মিনিটের জন্য সনিিকেট করুন।
ফ্লাস্ককে ঘরের তাপমাত্রায় শীতল হতে দিন এবং মিথেনল / জলের (70/30) মিশ্রণ দিয়ে ভলিউমকে কমিয়ে দিন।
ফিল্টার এবং নমুনা একটি এইচপিএলসি শিশি এবং ক্যাপ মধ্যে রাখুন।
গুঁড়া এবং নরম এক্সট্রাক্ট (আটকানো)
50-এমএল ভলিউমেট্রিক ফ্লস্কে প্রায় 100 মিলিগ্রাম উত্তোলনের সঠিকভাবে ওজন করুন (0.1 মিলিগ্রাম)। (100 মিলিগ্রাম ওজন নিষ্কাশনের 50-60% কেভ্যালাকটোন সামগ্রীর উপর ভিত্তি করে) এটি 60 ° - 80 ° C গরম পানিতে স্নানের নিঃসরণ অবধি প্রবাহিত পাত্রে রেখে এক্সট্রাক্টটি রেখে is
40 মিনিট মিথেনল যোগ করুন এবং 10 মিনিটের জন্য বা সলিডগুলির সমস্ত দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত সোনিকেট করুন।
ফ্লাস্ককে ঘরের তাপমাত্রায় শীতল হতে দিন এবং মিথেনল এবং মিক্সের সাথে ভলিউমকে হ্রাস করতে দিন।
ফিল্টার এবং নমুনা একটি এইচপিএলসি শিশি এবং ক্যাপ মধ্যে রাখুন।
গুঁড়া নমুনা
কাভা নিষ্কাশন প্রায়শই মিশ্রিত হয় বা স্প্রে করে বিভিন্ন ক্যারিয়ারে শুকানো হয় successfully খাঁটি মিথেনল বা জলের সাহায্যে এটি প্রথম বের করা যায়।
ক্রোমাটোগ্রাফিক শর্তাদি:
কলাম: ওয়াইএমসিবাসিক, 5 মিমি, 4.6 x 250 মিমি
কলাম তাপমাত্রা: 40 ° C
ফ্লো রেট: ওয়াইএমসিবাসিকের জন্য 0.6 এমএল / মিনিট; জেস্পিয়ারের জন্য 1.0 এমএল / মিনিট
মোবাইল ফেজ: আইসোক্রেটিক 0.1% ফসফোরিক অ্যাসিড: আইসোপ্রোপাইল অ্যালকোহল: অ্যাসিটোনাইট্রাইল (64৪:१:20:২০ ভি / ভি)
সনাক্তকরণ: 220 এনএম (নির্বাচনের উন্নতির জন্য 246 এনএম বিকল্প)
ইনজেকশন ভলিউম: 5 .L
রান সময়: 30 মিনিট
পদ্ধতি:
নির্দেশিত হিসাবে রেফারেন্স মান সমাধান এবং নমুনা প্রস্তুতি প্রস্তুত।
নিষ্কাশন দ্রাবক ফাঁকা একটি একক ইঞ্জেকশন করুন।
মান প্রস্তুতি একক ইনজেকশন তৈরি করুন।
মানক ঘনত্বের বিপরীতে স্ট্যান্ডার্ড পিক অঞ্চলগুলির একটি লিনিয়ারিটি প্লট তৈরি করুন।
নমুনা প্রস্তুতি একক ইনজেকশন তৈরি করুন।
নমুনায় কাভালাকটোন ঘনত্ব গণনা করুন।
সিস্টেমের উপযুক্ততা:
লিনিয়ার রিগ্রেশন এর পারস্পরিক সম্পর্ক সহগ অবশ্যই ≥0.999 হতে হবে। ডেসেমেথক্সিয়্যাঙ্গোনিন এবং ইয়াংগিনিন শিখরের মধ্যে রেজোলিউশনটি অবশ্যই ১.≥ ডলার হতে হবে।
শানসি ওয়াই-হার্ব বায়োটেকনোলজি কোং, লিমিটেড